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检测补体蛋白在今天的血清制剂中的存在

发布时间:2019-04-12 信息来源:匿名 浏览次数:6019

  在细胞培养实践中,血清产品的热灭活一直被接受,并且是传递给新细胞培养者的基本方案之一。热灭活没有严格的标准方案,有些人说在56°C下孵育30分钟,而有人说它可以使用45-62°C的温度和15-60分钟的孵育时间有效地进行。

  无论如何,许多人坚信这是保持细胞快乐的必要步骤。然而,这些协议起源于20世纪70年代之前,当时血清的收集,处理和理解仍然存在技术缺陷。

  蛋白质,如补体,可以干扰细胞系的免疫反应。Triglia和Linscott在1980年证实,胎牛血清(FBS)含有1-3%的成人水平的凝集素,C1和C6,以及5-39%的成人水平的剩余成分,除了C3¹。1979年Soltis 等人。表明补体的热灭活需要避免免疫球蛋白聚集。

  上述发现是在20世纪90年代之前发现的,最近没有研究检测补体蛋白在今天的血清制剂中的存在。根据Hyclone在1996年发布的技术说明,发现这些成分对溶血没有影响,即使使用未稀释的血清。

  使用热灭活的一个问题是它可能破坏生长因子,维生素,氨基酸和促进细胞生长导致细胞生长速率不佳的其他成分。因此,六种细胞系(HBAE,MDBK,Vero,人包皮成纤维细胞,MRC-5和Mv1Lu)的生长受到热灭活的不利影响。三种细胞系(FOX-NY杂交体,MDCK和CHO-K1)的生长不受热灭活的影响。相反,只有两种细胞系(Balb / 3T3和Sp2 / 0Ag14杂合体)在热灭活血清中表现出略微改善的性能,但改善很小。


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